عنوان
|
بررسی و مقایسۀ شبکۀ ارتباطی و نحوۀ بیان ژن های KLF4 و POU5F1 طی فرایند اسپرماتوژنز
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپشده
|
کلیدواژهها
|
اسپرماتوژنز، سلول های بنیادی اسپرم ساز، مسیرهای سیگنالینگ، KLF4، POU5F1
|
چکیده
|
مقدمه: اسپرماتوژنز فرایند اصلی تولید اسپرم است که در لوله های اسپرم ساز انجام می شود. سلول های بنیادی اسپرم ساز (SSCها) توانایی خودنوسازی، تمایز و انتقال اطلاعات ژنتیکی را به نسل های بعدی دارند. KLF4 و POU5F1 جزو عامل های رونویسی هستند که در طیف وسیعی از بافت ها بیان می شوند و نقش مهمی در فرایندهایی مانند آپوپتوز، تمایز و تکثیر و توسعۀ سلولی ایفا می کنند. هدف از مطالعۀ حاضر بررسی میزان بیان ژن های KLF4 و POU5F1 در سلول های بنیادی جنینی موش (mESCs)، سلول های بنیادی اسپرم ساز (SSCs)، سلول های بنیادی شبه جنینی (ES-like) و سلول های بیضه و همچنین شناسایی مسیرهای سیگنالینگ مرتبط با آن ها در فرایند اسپرماتوژنز است.
مواد و روشها: در این مطالعۀ تجربی، سلول های اسپرم ساز از بیضۀ موش با استفاده از روش هضم آنزیمی استخراج گردید و در محیط کشت GSC موش حاوی FGF، EGF و GDNF کشت داده شدند؛ سپس بیان ژن های KLF4 و POU5F1 با روش های ایمونوسیتوشیمی، ایمونوهیستوشیمی و واکنش زنجیره ای پلیمراز رونویسی معکوس در سلول های mESCs، SSCs، ES-like و سلول های بیضه بررسی گردید و تعاملات پروتئین-پروتئین و مسیر سیگنالینگ با روش های بیوانفورماتیکی ارزیابی شد.
یافته های پژوهش: ژن های KLF4 و POU5F1 در سلول های ES-like و بیضه بیان مثبت داشتند. اندازه گیری میزان بیان mRNA KLF4 و mRNA POU5F1 نشان داد که بیان KLF4 در سلول های mESCs و ES-like نسبت به سایر سلول ها بیشتر و میزان بیان POU5F1 در سلول های SSCs بیشتر است و KLF4 و POU5F1، هر دو از ژن های اصلی و قدرتمندند که یک کلاس مشترک و عملکرد مشترک دارند.
بحث و نتیجه گیری: این نتایج نشان می دهد که KLF4 و POU5F1 از عامل های ضروری برای انجام صحیح فرایند اسپرماتوژنز هستند و در سلول های mESCs، SSCs، ES-like و سلول های بیضه بیان دارند. این فاکتورها از عامل های اصلی سلول های بنیادی جنسی و عوامل پرتوانی سلول های بنیادی به شمار می روند و قابلیت استفاده به عنوان عامل های تشخیصی برای این رده های سلولی را دارند.
|
پژوهشگران
|
مائده یزدانی (نفر اول)، حسین عزیزی (نفر دوم)، داریوش غلامی (نفر سوم)، امیر خاکی (نفر چهارم)
|