Title
|
بررسي و مقايسۀ شبكۀ ارتباطي و نحوۀ بيان ژن هاي KLF4 و POU5F1 طي فرايند اسپرماتوژنز
|
Type
|
Article
|
Keywords
|
اسپرماتوژنز، سلول هاي بنيادي اسپرم ساز، مسيرهاي سيگنالينگ، KLF4، POU5F1
|
Abstract
|
مقدمه: اسپرماتوژنز فرايند اصلي توليد اسپرم است كه در لوله هاي اسپرم ساز انجام مي شود. سلول هاي بنيادي اسپرم ساز (SSCها) توانايي خودنوسازي، تمايز و انتقال اطلاعات ژنتيكي را به نسل هاي بعدي دارند. KLF4 و POU5F1 جزو عامل هاي رونويسي هستند كه در طيف وسيعي از بافت ها بيان مي شوند و نقش مهمي در فرايندهايي مانند آپوپتوز، تمايز و تكثير و توسعۀ سلولي ايفا مي كنند. هدف از مطالعۀ حاضر بررسي ميزان بيان ژن هاي KLF4 و POU5F1 در سلول هاي بنيادي جنيني موش (mESCs)، سلول هاي بنيادي اسپرم ساز (SSCs)، سلول هاي بنيادي شبه جنيني (ES-like) و سلول هاي بيضه و همچنين شناسايي مسيرهاي سيگنالينگ مرتبط با آن ها در فرايند اسپرماتوژنز است.
مواد و روشها: در اين مطالعۀ تجربي، سلول هاي اسپرم ساز از بيضۀ موش با استفاده از روش هضم آنزيمي استخراج گرديد و در محيط كشت GSC موش حاوي FGF، EGF و GDNF كشت داده شدند؛ سپس بيان ژن هاي KLF4 و POU5F1 با روش هاي ايمونوسيتوشيمي، ايمونوهيستوشيمي و واكنش زنجيره اي پليمراز رونويسي معكوس در سلول هاي mESCs، SSCs، ES-like و سلول هاي بيضه بررسي گرديد و تعاملات پروتئين-پروتئين و مسير سيگنالينگ با روش هاي بيوانفورماتيكي ارزيابي شد.
يافته هاي پژوهش: ژن هاي KLF4 و POU5F1 در سلول هاي ES-like و بيضه بيان مثبت داشتند. اندازه گيري ميزان بيان mRNA KLF4 و mRNA POU5F1 نشان داد كه بيان KLF4 در سلول هاي mESCs و ES-like نسبت به ساير سلول ها بيشتر و ميزان بيان POU5F1 در سلول هاي SSCs بيشتر است و KLF4 و POU5F1، هر دو از ژن هاي اصلي و قدرتمندند كه يك كلاس مشترك و عملكرد مشترك دارند.
بحث و نتيجه گيري: اين نتايج نشان مي دهد كه KLF4 و POU5F1 از عامل هاي ضروري براي انجام صحيح فرايند اسپرماتوژنز هستند و در سلول هاي mESCs، SSCs، ES-like و سلول هاي بيضه بيان دارند. اين فاكتورها از عامل هاي اصلي سلول هاي بنيادي جنسي و عوامل پرتواني سلول هاي بنيادي به شمار مي روند و قابليت استفاده به عنوان عامل هاي تشخيصي براي اين رده هاي سلولي را دارند.
|
Researchers
|
Maeda Yazdani (First researcher) , hossein azizi (Second researcher) , dariush gholami (Third researcher) , amir khaki (Fourth researcher)
|