|
عنوان
|
ارزیابی مقایسه ای چهار روش استخراج DNA از نمونه های تازه و خشک پنج گیاه دارویی از خانواده نعناعیان
|
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپ‌شده
|
|
کلیدواژه‌ها
|
مطالعات مولکولی، متابولیتهای ثانویه، تکثیر PCR ، روش موری و تامپسون
|
|
چکیده
|
به طورکلی، استخراج DNA ژنومی با کمیت و کیفیت مناسب از گیاهان دارویی به دلیل بیوسنتز مقادیر باالیی از متابولیتهای ثانویه با مشکلات زیادی همراه است. از طرف دیگر، برای انجام مطالعات زیست شناسی مولکولی نیاز به استخراج موفقیت آمیز DNA ژنومی با درجه خلوص بالا میباشد. از اینرو، در این آزمایش چهار روش استخراج DNA شامل موری و تامپسون )1980 ،)دالپورتا و همکاران
)1983 ،)دویل و دویل )1990 )و زیگن هاگن و همکاران )1993 )از نمونههای برگی تازه و خشک گیاهان رزماری، اسطوخودوس، گل ارونه، زرینگیاه و کاکوتی بهمنظور گزینش بهترین روش موردبررسی و ارزیابی قرار گرفتند. پس از آنالیز کمی و کیفی DNA ژنومی استخراج شده با استفاده از روشهای اسپکتروفتومتری و الکتروفورز در ژل آگارز، تکثیر نمونههای DNA با استفاده از دو آغازگر مربوط به نشانگر ISSR در واکنش زنجیرهای پلیمراز نیز موردبررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که روش تغییر یافته موری و تامپسون بهدلیل غلظت باالی DNA ژنومی استخراج شده )57/570 نانوگرم در میکرولیتر(، کیفیت بهتر )80/1 )و صرف هزینه و زمان کمتر میتواند
بهعنوان مؤثرترین روش استخراج برگزیده شود. همچنین، کمیت و کیفیت DNA ژنومی نمونههای برگی تازه از گیاهان دارویی موردمطالعه در مقایسه با نمونههای خشک باالتر بود. عالوهبر این، الگوی بانددهی ایجاد شده توسط ژل اگارز 1 درصد و PCR نیز نتایج یکسانی نشان داد. بر این اساس، روش استخراج موری و تامپسون )1980 )جهت استخراج DNA نمونههای برگی تازه و خشک از
گیاهان دارویی مشابه که حاوی متابولیتهای ثانویه باال میباشند، قابل توصیه است.
|
|
پژوهشگران
|
فرشته مسکنی (نفر اول)، سید علی اندی (نفر دوم)، علی عزیزی (نفر سوم)
|