|
Title
|
ارزيابي مقايسه اي چهار روش استخراج DNA از نمونه هاي تازه و خشك پنج گياه دارويي از خانواده نعناعيان
|
|
Type
|
Article
|
|
Keywords
|
مطالعات مولكولي، متابوليتهاي ثانويه، تكثير PCR ، روش موري و تامپسون
|
|
Abstract
|
به طوركلي، استخراج DNA ژنومي با كميت و كيفيت مناسب از گياهان دارويي به دليل بيوسنتز مقادير بااليي از متابوليتهاي ثانويه با مشكلات زيادي همراه است. از طرف ديگر، براي انجام مطالعات زيست شناسي مولكولي نياز به استخراج موفقيت آميز DNA ژنومي با درجه خلوص بالا ميباشد. از اينرو، در اين آزمايش چهار روش استخراج DNA شامل موري و تامپسون )1980 ،)دالپورتا و همكاران
)1983 ،)دويل و دويل )1990 )و زيگن هاگن و همكاران )1993 )از نمونههاي برگي تازه و خشك گياهان رزماري، اسطوخودوس، گل ارونه، زرينگياه و كاكوتي بهمنظور گزينش بهترين روش موردبررسي و ارزيابي قرار گرفتند. پس از آناليز كمي و كيفي DNA ژنومي استخراج شده با استفاده از روشهاي اسپكتروفتومتري و الكتروفورز در ژل آگارز، تكثير نمونههاي DNA با استفاده از دو آغازگر مربوط به نشانگر ISSR در واكنش زنجيرهاي پليمراز نيز موردبررسي قرار گرفت. نتايج نشان داد كه روش تغيير يافته موري و تامپسون بهدليل غلظت باالي DNA ژنومي استخراج شده )57/570 نانوگرم در ميكروليتر(، كيفيت بهتر )80/1 )و صرف هزينه و زمان كمتر ميتواند
بهعنوان مؤثرترين روش استخراج برگزيده شود. همچنين، كميت و كيفيت DNA ژنومي نمونههاي برگي تازه از گياهان دارويي موردمطالعه در مقايسه با نمونههاي خشك باالتر بود. عالوهبر اين، الگوي بانددهي ايجاد شده توسط ژل اگارز 1 درصد و PCR نيز نتايج يكساني نشان داد. بر اين اساس، روش استخراج موري و تامپسون )1980 )جهت استخراج DNA نمونههاي برگي تازه و خشك از
گياهان دارويي مشابه كه حاوي متابوليتهاي ثانويه باال ميباشند، قابل توصيه است.
|
|
Researchers
|
Freshteh Maskani (First researcher) , seyed ali andi (Second researcher) , Ali Azizi (Third researcher)
|