|
عنوان
|
کلونینگ مولکولی و ارزیابی توالی ژن ھای دومین متصل شونده بھ
رسپتور ) (RBDو جایگاه برش پروتئازی در SARS-CoV-2
|
|
نوع پژوهش
|
مقاله ارائه‌شده
|
|
کلیدواژه‌ها
|
بیماری کروناویروس ،2019واکنش زنجیره ای پلیمراز،
کلونینگ مولکولی
|
|
چکیده
|
اخیرا بیماری کرونا ویروس (COVID-19) 2019با سرعتی غیرقابل تصور در
سراسر جھان در حال گسترش است. این ویروس بھ کمک گلیکوپروتئین تاج
) (Sخود از طریق برھمکنش با آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین (ACE2) 2
بعنوان گیرنده ھای سلول میزبان باعث تسھیل اتصال و نفوذ ویروس می
شود. در نتیجھ در این پژوھش ما پس از استخراج RNAویروس و سنتز
cDNAبھ کمک طراحی پرایمرھای اختصاصی ژن ھای دومین متصل شونده بھ
رسپتور ) (RBDو جایگاه برش پروتئازی S1/S2در SARS-CoV-2قادر بھ
جداسازی این دو ژن بھ کمک واکنش زنجیره ای پلیمراز ) (PCRشدیم. در
نھایت پس از لیگاسیون این دو ژن در وکتور(+) pET-28aو ترانسفورم بھ
باکتری ای. کلای ) (DH5aکلونینگ آنھا انجام شد. سپس کلون ھا از نظر
نوترکیب بودن بھ کمک سھ روش متداول شامل کلنی ،PCRھضم دوگانھ
سازه ھای نھایی و توالی یابی از پلاسمید ھای نوترکیب مورد ارزیابی
قرار گرفتند. کلونینگ مولکولی این دو ژن کھ نقش اساسی در بیماری
زایی SARS-CoV-2دارند می تواند آغازی برای تولید این دو پروتئین
بعنوان کاندیدای امیدوار کننده بعنوان ایمنوتراپی فعال )واکسن(
در تحریک ایمنی و ساخت آنتی بادی ھای خنثی کننده و ھمچنین با ساخت
ستون ایمنو افینیتی بر پایھ این دو پروتئین، قادر بھ جداسازی
آنتی بادی ھای خنثی کننده ضد این دو پروتئین از سرم افراد بھبود
یافتھ خواھیم بود کھ می توان بعنوان یک روش )ایمنو تراپی
غیرفعال( امیدوار کننده در درمان COVID-19بھره برد
|
|
پژوهشگران
|
سید امیرحسین محمدزاده حسینی مقری (نفر اول)، مجتبی رنجبر (نفر دوم)، هادی حسن نیا (نفر سوم)، فاطمه خاکدان (نفر چهارم)
|