Title
|
كلونينگ مولكولي و ارزيابي توالي ژن ھاي دومين متصل شونده بھ
رسپتور ) (RBDو جايگاه برش پروتئازي در SARS-CoV-2
|
Type
|
Presentation
|
Keywords
|
بيماري كروناويروس ،2019واكنش زنجيره اي پليمراز،
كلونينگ مولكولي
|
Abstract
|
اخيرا بيماري كرونا ويروس (COVID-19) 2019با سرعتي غيرقابل تصور در
سراسر جھان در حال گسترش است. اين ويروس بھ كمك گليكوپروتئين تاج
) (Sخود از طريق برھمكنش با آنزيم تبديل كننده آنژيوتانسين (ACE2) 2
بعنوان گيرنده ھاي سلول ميزبان باعث تسھيل اتصال و نفوذ ويروس مي
شود. در نتيجھ در اين پژوھش ما پس از استخراج RNAويروس و سنتز
cDNAبھ كمك طراحي پرايمرھاي اختصاصي ژن ھاي دومين متصل شونده بھ
رسپتور ) (RBDو جايگاه برش پروتئازي S1/S2در SARS-CoV-2قادر بھ
جداسازي اين دو ژن بھ كمك واكنش زنجيره اي پليمراز ) (PCRشديم. در
نھايت پس از ليگاسيون اين دو ژن در وكتور(+) pET-28aو ترانسفورم بھ
باكتري اي. كلاي ) (DH5aكلونينگ آنھا انجام شد. سپس كلون ھا از نظر
نوتركيب بودن بھ كمك سھ روش متداول شامل كلني ،PCRھضم دوگانھ
سازه ھاي نھايي و توالي يابي از پلاسميد ھاي نوتركيب مورد ارزيابي
قرار گرفتند. كلونينگ مولكولي اين دو ژن كھ نقش اساسي در بيماري
زايي SARS-CoV-2دارند مي تواند آغازي براي توليد اين دو پروتئين
بعنوان كانديداي اميدوار كننده بعنوان ايمنوتراپي فعال )واكسن(
در تحريك ايمني و ساخت آنتي بادي ھاي خنثي كننده و ھمچنين با ساخت
ستون ايمنو افينيتي بر پايھ اين دو پروتئين، قادر بھ جداسازي
آنتي بادي ھاي خنثي كننده ضد اين دو پروتئين از سرم افراد بھبود
يافتھ خواھيم بود كھ مي توان بعنوان يك روش )ايمنو تراپي
غيرفعال( اميدوار كننده در درمان COVID-19بھره برد
|
Researchers
|
Seyed AmirHossein Mohammadzadeh Hosseini Moghri (First researcher) , mojtaba ranjbar (Second researcher) , h hh (Third researcher) , Fatemeh Khakdan (Fourth researcher)
|