|
عنوان
|
بکارگیری تکنیک نوین ترکیب PCR کمی با پروپیدیوم مونوآزید جهت شمارش استافیلوکوکوس اورئوس
انتروتوکسیژنیک در محصولات خامهای قنادی
|
|
نوع پژوهش
|
مقاله چاپ‌شده
|
|
کلیدواژه‌ها
|
استافیلوکوکوس اورئوس، پروپیدیوم مونوآزید، واکنش زنجیرهای پلیمراز، محصولات قنادی، مسمومیت
|
|
چکیده
|
زمینۀ مطالعه: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از پاتوژنهای مهم انسانی است که عامل بروز عفونت بوده و نیز با تولید انواع مختلف انتروتوکسینها موجب مسمومیتهای
غذایی میگردد. استفاده از روشهای معمول کشت جهت شمارش استافیلوکوکوس اورئوس دارای محدودیتهایی مانند مدت زمان طولانی برای رشد باکتری و فقدان
حساسیت و دقت لازم در مورد سلولهای زنده غیرقابل کشت میباشد.
هدف: هدف از انجام این پژوهش جستجو و شمارش استافیلوکوکوس اورئوس تولید کننده انتروتوکسینهای A-E در محصولات خامهای قنادی با استفاده از روش
PCR زمان واقعی در ترکیب با پروپیدیوم مونوآزید (PMA) جهت تفکیک سلولهای زنده از مرده بود.
روشکار: تعداد 111 نمونه شیرینی خامهای به مدت 2 ماه و به صورت تصادفی از کارگاههای قنادی شهر آمل تهیه شد. پس از تهیه رقت از نمونه، پلتهای باکتریایی
جداسازی و قبل از استخراج DNA ، با PMA تیمار شدند. PCR زمان واقعی جهت شمارش کل سلولهای استافیلوکوکوس اورئوس و نیز سویههای انتروتوکسیژنیک
آن با استفاده از پرایمرهای اختصاصی انجام شد.
نتایج: نتایج شمارش کشت معمولی به نتایج PMA-qPCR <1/ بسیار نزدیک بود ) 17 P (، لیکن دادههای به دست آمده از qPCR که مجموع سلولهای مرده و زنده
را شمارش مینماید از نتایج دو روش دیگر تعداد بیشتری باکتری را نشان داد. حساسیت روش به کار رفته در این مطالعه جهت جستجوی تعداد اندک استافیلوکوکوس
اورئوس )کمتر از 11 سلول در گرم( قابل ملاحظه به نظر میرسد.
نتیجهگیری نهایی: یافتهها نشان داد که استفاده از PCR در ترکیب با PMA نتایج قابل اعتمادتری نسبت به روش معمولی کشت حاصل مینماید. با توجه به مدت
زمان کوتاه حصول نتایج، اختصاصی بودن و حساسیت قابل ملاحظه این روش امید است در آینده نزدیک در آزمایشگاههای کنترل کیفیت مواد غذایی دستگاههای
نظارتی به کار گرفته شود.
|
|
پژوهشگران
|
مریم عزیزخانی (نفر اول)، فهیمه توریان (نفر دوم)
|