|
Title
|
بكارگيري تكنيك نوين تركيب PCR كمي با پروپيديوم مونوآزيد جهت شمارش استافيلوكوكوس اورئوس
انتروتوكسيژنيك در محصولات خامهاي قنادي
|
|
Type
|
Article
|
|
Keywords
|
استافيلوكوكوس اورئوس، پروپيديوم مونوآزيد، واكنش زنجيرهاي پليمراز، محصولات قنادي، مسموميت
|
|
Abstract
|
زمينۀ مطالعه: استافيلوكوكوس اورئوس يكي از پاتوژنهاي مهم انساني است كه عامل بروز عفونت بوده و نيز با توليد انواع مختلف انتروتوكسينها موجب مسموميتهاي
غذايي ميگردد. استفاده از روشهاي معمول كشت جهت شمارش استافيلوكوكوس اورئوس داراي محدوديتهايي مانند مدت زمان طولاني براي رشد باكتري و فقدان
حساسيت و دقت لازم در مورد سلولهاي زنده غيرقابل كشت ميباشد.
هدف: هدف از انجام اين پژوهش جستجو و شمارش استافيلوكوكوس اورئوس توليد كننده انتروتوكسينهاي A-E در محصولات خامهاي قنادي با استفاده از روش
PCR زمان واقعي در تركيب با پروپيديوم مونوآزيد (PMA) جهت تفكيك سلولهاي زنده از مرده بود.
روشكار: تعداد 111 نمونه شيريني خامهاي به مدت 2 ماه و به صورت تصادفي از كارگاههاي قنادي شهر آمل تهيه شد. پس از تهيه رقت از نمونه، پلتهاي باكتريايي
جداسازي و قبل از استخراج DNA ، با PMA تيمار شدند. PCR زمان واقعي جهت شمارش كل سلولهاي استافيلوكوكوس اورئوس و نيز سويههاي انتروتوكسيژنيك
آن با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي انجام شد.
نتايج: نتايج شمارش كشت معمولي به نتايج PMA-qPCR <1/ بسيار نزديك بود ) 17 P (، ليكن دادههاي به دست آمده از qPCR كه مجموع سلولهاي مرده و زنده
را شمارش مينمايد از نتايج دو روش ديگر تعداد بيشتري باكتري را نشان داد. حساسيت روش به كار رفته در اين مطالعه جهت جستجوي تعداد اندك استافيلوكوكوس
اورئوس )كمتر از 11 سلول در گرم( قابل ملاحظه به نظر ميرسد.
نتيجهگيري نهايي: يافتهها نشان داد كه استفاده از PCR در تركيب با PMA نتايج قابل اعتمادتري نسبت به روش معمولي كشت حاصل مينمايد. با توجه به مدت
زمان كوتاه حصول نتايج، اختصاصي بودن و حساسيت قابل ملاحظه اين روش اميد است در آينده نزديك در آزمايشگاههاي كنترل كيفيت مواد غذايي دستگاههاي
نظارتي به كار گرفته شود.
|
|
Researchers
|
maryam azizkhani (First researcher) , fahimeh tooryan (Second researcher)
|